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細(xì)胞凍存安全指南:DMSO凍存液如何使用?

更新時間:2024-07-01

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為確保細(xì)胞在凍存過程中保持活力,正確使用DMSO凍存液至關(guān)重要。以下是關(guān)于如何正確使用DMSO凍存液的指南:

 

1. 選擇合適的細(xì)胞:選擇對數(shù)生長期、生長狀態(tài)良好的細(xì)胞進行凍存。

2. 準(zhǔn)備凍存液:配制含10%DMSO(可根據(jù)細(xì)胞類型調(diào)整至5-12%)和適當(dāng)比例的基礎(chǔ)培養(yǎng)基或血清的凍存液。確保凍存液新鮮配置或保存得當(dāng)。

3. 清洗細(xì)胞:用PBS清洗細(xì)胞,去除殘留的培養(yǎng)基和血清。

4. 收集并懸浮細(xì)胞:通過離心收集細(xì)胞,并用凍存液輕輕懸浮細(xì)胞,確保細(xì)胞均勻分布。

5. 分裝與標(biāo)記:將細(xì)胞懸液分裝至凍存管中,每管1~1.5ml,并標(biāo)記細(xì)胞的名稱、日期和操作者。

6. 控制降溫速率:將凍存管放入冷凍器中,逐漸降低溫度至-80°C或更低,降溫速率控制在-1~-2°C/min。在-25°C以下時,可增至-5~-10°C/min。

7. 長期儲存:細(xì)胞到達-80°C或更低溫度后,可移至液氮容器中長期保存。

 

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