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我們注意到許多實(shí)驗(yàn)者在使用ProteanFect Max轉(zhuǎn)染試劑盒時(shí),往往容易忽視一個(gè)至關(guān)重要的步驟——充分混勻!
今天,我們特別強(qiáng)調(diào)這一關(guān)鍵環(huán)節(jié),混勻充分對(duì)轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)結(jié)果影響非常大。
為什么混勻如此重要?
ProteanFect Max作為全·球首·款自組裝蛋白納米顆粒核酸轉(zhuǎn)染試劑,其高效轉(zhuǎn)染的秘密在于形成均一且穩(wěn)定的納米復(fù)合物。每一步的充分混勻確保了納米顆粒的正確形成,直接影響轉(zhuǎn)染效率和實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可重復(fù)性。
正確的混勻步驟
ProteanFect凝聚體轉(zhuǎn)染體系配置雖然簡(jiǎn)單,但每一步都需要認(rèn)真對(duì)待:
1. 混合Reagent A與核酸
·將核酸加入Reagent A中
·須混勻(Reagent A使用前需顛倒混勻)
2. 加入Reagent B
·向上述混合液中加入Reagent B
·一定要充分混勻(使用移液槍上下吹打20-30次,大體系渦旋10s)
3. 加入Reagent C(僅原代細(xì)胞需要)
·往上述混合物中加入Reagent C
·如觀察到Reagent C溶液有析出,請(qǐng)?jiān)?5℃水浴至完·全溶解后使用
·一定要充分混勻(使用移液槍上下吹打20-30次,大體系渦旋10s),否則可能會(huì)影響細(xì)胞活率
正確的混勻方法
·使用移液槍上下吹打20-30次(大約1分鐘)
·或使用渦旋儀混勻10秒
錯(cuò)誤方法?
·用手指彈管壁
·在桌子上劃蹭混合
·統(tǒng)一加入所有試劑后再一次混勻
·輕微搖晃幾下就認(rèn)為已混勻
特別提醒
1. 在配置ProteanFect轉(zhuǎn)染體系過程中,如出現(xiàn)輕微粘稠現(xiàn)象,屬正?,F(xiàn)象。
2. 體系配置完成后建議置于冰上保存;如需在室溫下保存,須在30分鐘內(nèi)使用完畢。
3. 如觀察到Reagent C溶液有析出,請(qǐng)?jiān)?5℃水浴至完·全溶解后使用。
希望以上提示能幫助您獲得最佳的轉(zhuǎn)染效果!